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卡梅德生物科技（天津）有限公司
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卡梅德生物科技（天津）有限公司
入驻年限：6 年
- 联系人：
卡梅德-小智
- 所在地区：
天津 武清区
- 业务范围：
抗体、技术服务、体外诊断、原辅料包材、细胞库 / 细胞培养、ELISA 试剂盒
- 经营模式：
生产厂商
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咨询公司新闻/正文
关于羊驼单B细胞单抗制备技术的常见问题？
382 人阅读发布时间：2024-02-19 18:21
1.制备羊驼单B细胞单抗，对客户提供的样品有什么要求？
重组蛋白：≥2.5 mg，要求蛋白纯度>85%，蛋白要求分子量大于10 kDa，可溶性蛋白浓度在0.5~5mg/mL之间。若要求抗原亲和纯化，需额外提供10 mg左右重组蛋白。
多肽与小分子：裸肽≥10 mg，多肽纯度>90%，不少于10个AA，偶联KLH/BSA/OVA或其他载体蛋白；小分子需要预先对结构进行评估。
细菌和病毒样品：是否对人致病；灭活方式；灭活前后SDS PAGE检测图，清楚标示样品上样量，Marker上样量，以及各自的浓度。
2.单个B细胞筛选后，抗体是如何组装的，如何设计它的重链和轻链引物？
分别从单个B细胞中扩出抗体的重轻链基因，共表达转染细胞。引物可以通过germline基因序列来设计[2]。
3.羊驼单B细胞单抗制备服务的服务内容主要包括哪些？
（1）半抗原改造/完全抗原制备。
（2）抗原乳化，免疫羊驼4-5次；ELISA效价测定；抗血清采集。
（3）PBMC分离；FACS Assay、ELISA Assay。
（4）RT-PCR；高通量测序。
（5）抗体小规模转染或放大。
4.羊驼单B细胞单抗制备服务交付的材料有哪些？
（1）改造产物及鉴定结果。
（2）免疫血清；ELISA检测结果；实验记录。
（3）高通量筛选结果报告，保证序列多样性的FACS binder；ELISA检测结果报告，阳性克隆株。
（4）测序原始数据；特异性序列。
（5）表达质粒，纯化抗体。
5.单克隆细胞稳定性差如何解决？
定期检测单克隆细胞的稳定性，选择稳定的单克隆细胞进行扩增和抗体生产。
6.B细胞大概培养多久可以用于ELISA检测，抗体量会达到多少？
B细胞培养10-12天可用于ELISA检测，抗体量在0.2 μg/mL ~ >10 μg/mL。
7.单个B细胞技术会成为治疗性抗体开发的金标准吗？
虽然单个B细胞技术逐渐成为抗体开发的主流技术之一，但是抗体开发的技术路线仍然有很多种，如杂交瘤和噬菌体展示等，这些方法各有优缺点，相互之间是互补关系[3]。
8.单个B细胞直接裂解后与培养后的PCR成功率哪个更高？
单个B细胞培养后的PCR成功率更高。培养后的B细胞经过扩增，细胞数增加，模板量更高。
单B细胞单抗制备技术是近些年来新兴的一种抗体制备技术。卡梅德生物利用此技术，从羊驼外周血或免疫器官中提取淋巴细胞，通过分选技术鉴定和分离出特定的B细胞后将其进行单细胞培养，使用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）和抗体特异性引物鉴定单B细胞分泌抗体的特异性，通过PCR技术扩增出特异性抗体基因，将其克隆到表达载体中，并在客户指定的系统中进行表达，纯化好的抗体通过ELISA等方法进行表达验证。卡梅德生物利用单B细胞单抗制备技术获得的抗体品质出众，且成功率高。详情可咨询卡梅德生物官网https://www.kmdbioscience.cn/pages/yangtuodanbxibaodankangzhibeifuwu.html或直接拔打13116038708咨询。
重组蛋白：≥2.5 mg，要求蛋白纯度>85%，蛋白要求分子量大于10 kDa，可溶性蛋白浓度在0.5~5mg/mL之间。若要求抗原亲和纯化，需额外提供10 mg左右重组蛋白。
多肽与小分子：裸肽≥10 mg，多肽纯度>90%，不少于10个AA，偶联KLH/BSA/OVA或其他载体蛋白；小分子需要预先对结构进行评估。
细菌和病毒样品：是否对人致病；灭活方式；灭活前后SDS PAGE检测图，清楚标示样品上样量，Marker上样量，以及各自的浓度。
2.单个B细胞筛选后，抗体是如何组装的，如何设计它的重链和轻链引物？
分别从单个B细胞中扩出抗体的重轻链基因，共表达转染细胞。引物可以通过germline基因序列来设计[2]。
3.羊驼单B细胞单抗制备服务的服务内容主要包括哪些？
（1）半抗原改造/完全抗原制备。
（2）抗原乳化，免疫羊驼4-5次；ELISA效价测定；抗血清采集。
（3）PBMC分离；FACS Assay、ELISA Assay。
（4）RT-PCR；高通量测序。
（5）抗体小规模转染或放大。
4.羊驼单B细胞单抗制备服务交付的材料有哪些？
（1）改造产物及鉴定结果。
（2）免疫血清；ELISA检测结果；实验记录。
（3）高通量筛选结果报告，保证序列多样性的FACS binder；ELISA检测结果报告，阳性克隆株。
（4）测序原始数据；特异性序列。
（5）表达质粒，纯化抗体。
5.单克隆细胞稳定性差如何解决？
定期检测单克隆细胞的稳定性，选择稳定的单克隆细胞进行扩增和抗体生产。
6.B细胞大概培养多久可以用于ELISA检测，抗体量会达到多少？
B细胞培养10-12天可用于ELISA检测，抗体量在0.2 μg/mL ~ >10 μg/mL。
7.单个B细胞技术会成为治疗性抗体开发的金标准吗？
虽然单个B细胞技术逐渐成为抗体开发的主流技术之一，但是抗体开发的技术路线仍然有很多种，如杂交瘤和噬菌体展示等，这些方法各有优缺点，相互之间是互补关系[3]。
8.单个B细胞直接裂解后与培养后的PCR成功率哪个更高？
单个B细胞培养后的PCR成功率更高。培养后的B细胞经过扩增，细胞数增加，模板量更高。
单B细胞单抗制备技术是近些年来新兴的一种抗体制备技术。卡梅德生物利用此技术，从羊驼外周血或免疫器官中提取淋巴细胞，通过分选技术鉴定和分离出特定的B细胞后将其进行单细胞培养，使用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）和抗体特异性引物鉴定单B细胞分泌抗体的特异性，通过PCR技术扩增出特异性抗体基因，将其克隆到表达载体中，并在客户指定的系统中进行表达，纯化好的抗体通过ELISA等方法进行表达验证。卡梅德生物利用单B细胞单抗制备技术获得的抗体品质出众，且成功率高。详情可咨询卡梅德生物官网https://www.kmdbioscience.cn/pages/yangtuodanbxibaodankangzhibeifuwu.html或直接拔打13116038708咨询。